文献中心

醋柳总黄酮防治冠心病药理基础研究

黄良月   刘常伍   范维衡
张白嘉   杨亚斯   雷玉兰
（四川省中药研究所药理室）
张尊仪   杨正菀
（华西医科大学药理教研室）

    提要: 醋柳总黄酮对动物在大剂量（400mg/kg）一次性灌胃、连续3-7日小量用药（100-200mg/kg/d）或腹泻给药（400mg/kg）时均可增加心肌营养血流量，降低心肌耗氧量，提高动物耐缺氧的能力，对抗垂体后叶素所致的急性缺血性心肌损伤。此外，本品还能降低血清胆固醇，抑制血小板聚集，这些药理作用可能是本品临床上治疗冠心病有较好疗效的药理基础。醋柳总黄酮的毒性实验表明，本品无明显毒性，也没有致畸和突变作用，是一种安全而有效的药物。

    关键词: 醋柳总黄酮    冠心病    心肌耗氧量    抑制血小板聚集

    醋柳（Cu-Liu）又名沙棘，属胡颓子科（Elaegnaceae），学名Hippophae rhamnoidesL.，其果实中含有多种黄酮类化合物，如懈皮素、异鼠李素等。还含有大量维生素C及P。治疗高脂血症、心律紊乱、心绞痛和冠心病等，有一定疗效^[1][2]。为此，凯发k8国际对醋柳总黄酮防治冠心病的药理基础进行了探讨。

实验部分

一、材料

    醋柳总黄酮（Cu-Liu flavonoid）：为黄色或黄绿色粉末，由华西医科大学研究所提供，用生理盐水配成一定浓度的混悬液备用。
醋柳总黄酮注射液用0.4%的土温-80液配成含醋柳总黄酮0.1%的溶液备用。
氯化⁸⁶ 铷购自中国科学院原子研究所，用时以生理盐水稀释成所需浓度。
小鼠、大鼠及犬由四川省中药研究所和华西医科大学动物饲养室供给。

二、方法与结果

（一）   对小鼠心肌营养性血流量的影响^[3]
    用体重18-22G的健康小鼠，雌雄各半，随机分为给药组和对照组。给药组有
四组，给药情况见表1。于腹腔注射给药后半小时，或末次灌胃给药后一小时，由小鼠尾静脉注射⁸⁶ 铷生理盐水溶液0.1ML/只。30秒后断头处死，取心脏称重并用FT-603^#型г闪烁探头忽然GP-IB自动定标器进行脉冲数。三次实验的结果见表一。
由表1可见，各给药组小鼠心肌对⁸⁶ 铷的摄取均有显著的增加，表明醋柳总黄酮能显著增加小鼠心肌营养性血流量。
（二）   对犬冠脉流量和心肌耗氧量的影响
1、 用体重7.0-14.2KG的犬10只，静注戊巴比妥30MG/KG麻醉后，做气管插管安装呼吸机，记录颈总动脉血压以及心率。插入胃管以备灌胃给药。作右侧开胸术，静注肝素50MG/KG抗凝。仿KaBeP_HHa法冠窦状插管测定冠状窦流出量作为冠状流量^[4]。每间隔15分钟记录10秒钟冠状窦流出量的ML数、血压和心率。当血流量、血压和心率稳定后，用醋柳总黄酮混悬液400MG/KG或生理盐水灌胃，灌胃后15、30、45、60、75和90分钟，分别字颈总动脉、冠状窦取血，用舒劳氏微量血氧分析器测定颈总动脉、冠状窦静脉血氧含量，计算出动静脉血氧差，实验终止时，从冠状窦导管加压注入0.5%伊文思兰溶液25ML。取下心脏，称取全心及心肌兰区重量，计算出每分钟每100克心肌冠脉流量。再按动静脉血氧差求得不同取血时间的心肌耗氧量。结果见表二。

表一  醋柳总黄酮对小鼠心肌营养性血流量的影响

Table.The influence of Cu-Liu on zhe myocaxdial nutient blood floe in mice

  * P < 0.05 Compared with values before administration         ** P < 0.01

表2 醋柳总黄酮对麻醉犬心率、血压、冠状流量及心肌耗氧量均值标准误的影响

Tab2.The influence of Cu-Liu flavonoid on the heait rate,blood pressure,coronary blood flow,myocardial oxygen comsumption(means±S)in anesthetized doys

* P < 0.05compared with values before administration

由表2可见，灌胃给予生理盐水后，冠脉流量、血压和心率以及心肌耗氧量无明显变化。给醋柳总黄酮后90、60分钟，血压、心率、冠脉流量均稍有降低，无统计学意义。但心肌耗氧量于给药后60 分钟时显著减少（P〈0.05），表明醋柳总黄酮能降低麻醉狗心肌耗氧量。

2、用体重12KG以上犬只，用电磁流量计探头于左旋支，用西德Hellige多导生理仪记录其流量及心电、心率、颈动脉压力等，纸速为30mm/sec，肝素化后，经颈静脉行冠状窦插管，于给药前和给药后5、15、30分钟测定上述指标，并抽取冠状窦及动脉血液，用丹麦产ABL₂型血气分析仪测定血氧含量。同土温-80（醋柳总黄酮助溶剂）作对照性观察。结果使用醋柳总黄酮溶液（含醋柳总黄酮0.1%，土温0.4%）1mg/kg后各观察指标的变化与0.4%土温-80相比未发现有统计学差异。

（三）对大鼠急性心肌缺血的保护作用

    选用体重200-250G雄性大鼠90只，随机分为给药组和对照组。给药组分为二组，对照组也分为阳性及阴性对照，实验条件见表三。腹腔注射药物后半小时及未次口服给药后1小时，将清醒大鼠仰卧位固定，记录胸前导联的正常心电图。然后静注垂体后叶素0.5单位/KG，10秒钟内注完，注射后10、20、30、40、50、60、90秒和2分钟后各记录一次心电图。以给垂体后叶素后30 秒内S-T段升高1MM以上或两分钟内T波降50%以上或倒置作为心肌缺血的指标^[6] ，以不出现心肌缺血动物数与所以总动物之比表示心肌缺血阴性率。用药组与对照组比较，进行X²检验，结果见表3

表3 醋柳总黄酮对大鼠急性心肌缺血的保护作用

Tab.3.The prophylact:c of Cu-LiuFlavonoid on acute myocardial ischemia rats

* P < 0.5 Compared with values before administration ** p < 0.01

从表3可见，给予醋柳总黄酮各组均显示对垂体后叶素所致的心肌缺血有非常显著保护作用（P〈0.01〉

（四）对小鼠缺氧耐力的影响

1、对小鼠常压缺氧情况下生存时间的影响^[6]。

按常规方法测定，醋柳总黄酮组及对照组每只小鼠在缺氧条件下的生存时间，算出两批实验的各组平均值，并进行比较，结果见 表4

表4  醋柳总黄酮对小鼠常压缺氧情况下生存时间的影响

Tab4.The influence of Cu-Liu Flavonoid on survrval time of mice under situation with normal pressure and hypoxia

* P < 0.01

由表4可知、由表四可见，小鼠腹腔注射醋柳总黄酮400mg/kg，能明显延长在常压下缺氧情况下的生存时间。

2、对小鼠低压缺氧情况下生存率的影响。低氧缺氧实验装置，仿医科院药物所设计[5]。按常规方法测定给药组及对照组小鼠的死亡数和存活数，连续进行5-6次实验，累积两组小鼠的死亡数和存活数，以X2统计，本实验同时以腹腔注射心得安20MG/KG作平行性阳性对照观察。将五次实验数据的均值列入表5。

表5  醋柳总黄酮对小鼠低压缺氧情况下生存绿的影响

Tab.5 The influencc Cu-Liu flavonoid on the survival of rate of mice under hypobanic and hypoxia sitiuation

P < 0.01 Compared with values before administration

表五结果表明，醋柳总黄酮400MG/KG一次腹腔注射，能显著提高小鼠在低压缺氧情况下的存活率，其作用与心得安大致相当。

3、对给异丙肾上腺素小鼠的低压缺氧生存时间的影响

按常规方法测定给药组，异丙肾上腺素对照组和空白对照组小鼠在低压缺氧条件下的生存时间。结果见表6

表6 醋柳总黄酮对给异丙肾上腺素小鼠的低压缺氧生存时间的影响

Tab6.The influence of Cu-Liu Flavonoid on the survival time of mice being given isoprenaline under hypobaric and hypoxic situation

表6结果说明，腹腔注射醋柳总黄酮400MG/KG组较异丙肾上腺素对照组小鼠的生存时间有显著的延长（P〈0.05），表明本品可使异丙肾上腺素的心肌耗氧量明显减少。

（五）对大鼠体内脂质含量的影响

    用体重120~140G雄性大鼠25只，随机分为正常对照组、高脂对照组和给药组。除正常对照组给普通饲料外，其余均在普通饲料中加入胆固醇、胆酸、甲基硫氧嘧啶、猪油（2：0.1：0.05：5）组成高脂饲料。在给高脂饲料的同时，给药组每日灌胃醋柳总黄酮100MG/KG或200MG/KG一次，正常对照组和高脂对照组给药助溶剂（土温-80）一次，连续40天后，取血测定血小板聚集抑制率、血清TC

TG、HDL-CH；另取肝脏和主动脉分别提取测定TG和TC 。结果见表7。

表7  醋柳总黄酮对大鼠体内脂质的影响

Tab.7 The influence of Cu-Liu Flavonoid on the lipiids in rate

() number of animals      * p < 0.05Compared with the high fat diet contral group

表7 结果表明：醋柳总黄酮100MG/KG，200MG/KG，连续40 天灌胃，对血清总胆固醇升高有明显的预防作用。但对血清TG和肝脏、主动脉的脂质无明显影响，大剂量组对ADP导致的高脂动物的富血小班血浆中血小板聚集有一定抑制作用，抑制率为29.26%

（六）毒性实验

1、  急性毒性实验

醋柳总黄酮混悬液给小鼠一次灌胃，最大用药量达40G/KG，及在一天之内四次灌胃给药，总剂量达60G/KG，均未发现到小鼠有任何不良反应。

2、  亚急性毒性实验

选用体重50-60G的大鼠48只，雌雄各半，随机分为四组，给药组以醋柳总黄酮100MG/KG，200MG/KG和400MG/KG每天分别灌胃一次，对照组每天灌服等体积对照液（含土温-80）一次。给药100天后，取血测定血清谷丙转氨酶、碱性磷酸酶活性、尿素氮、血象，同时测定心电图，然后处死动物，行大体解剖观察。实验表明：各组间各指标均无明显差异。从而说明，醋柳总黄酮100MG/KG、200MG/KG和400MG/KG连续灌胃100天，未发现任何毒副作用。

3、  显性致死实验

选用体重28-34G健康性成熟的雄性小鼠30只，随机分为三组，醋柳总黄酮组每天灌服生理盐水，每天一次，连续七天，于交配前24小时一次腹腔注射甲基磺酸乙脂400MG/KG作为阳性对照组。然后按照常规进行显性致死实验，算出显性致死指数，本实验结果表明，醋柳总黄酮组与空白对照组相同，未发现显性致死作用，而阳性对照组注射甲基磺酸乙脂后显示了明显的阳性结果。

4、  致畸实验

选用性成熟雌鼠与雄鼠按2：1同笼过夜，每天上午查阴道涂片。把有精子的雌鼠随机分为对照组和给药组，每组7只，于受孕后第6天至第15天，分别用生理盐水和醋柳总黄酮400MG/KG灌胃，连续10天，于受孕后第20 天处死孕鼠，剖腹检查着床数、活胎数、胎重量及死胎数，并对活胎数进行外观检查，1/2活胎进行内脏检查，1/2活胎制备骨骼标本，检查骨骼发育情况。结果，醋柳总黄酮对着床数、胎仔数、胎重量、外部形状及内脏发育、骨骼发育均无明显影响。

小 结

    小鼠腹腔注射醋柳总黄酮400MG/KG一次或灌胃100MG/KG/日或200 MG/KG/日三天及七天。心肌营养性血流量明显增加并明显延长小鼠在常压缺氧情况下的生存时间，提高小鼠在低压缺氧情况下的存活率，对异丙肾上腺素增加心肌耗氧量也有明显对抗作用。表明醋柳总黄酮有明显的抗缺氧能力，同时，醋柳总黄酮对垂体后叶素所致的心肌缺血有保护作用；对血清总固醇的升高有降低作用；对高脂动物的富血小板血浆聚集有一定的抑制作用。

    综上所述醋柳总黄酮可呈现多方面有利于冠心病治疗的药理活性。加以醋柳总黄酮的急性和亚急性毒性实验和致突变及致畸实验的阴性结果，提示醋柳总黄酮在临床上治疗冠心病的高度安全性和有效性是具有多方面药理学依据的。

参考文献

1、 华西医科大学.心血管疾病资料汇编1978；1，98~103.
2、 华西医科大学.心血管疾病治疗汇编1978；1，94~97.
3、 朱秀媛，等.中华医学杂志1979；7，556~561
4、 KaBep Иha : øapmakol Иtokchkol 1957;21(1):39.
5、 中国医学科学院编.冠心病防治研究资料1973；13.
6、 中国药理学会编：《药理学进展》（心血管药理分册）1980：257~258，人民卫生出版社.